春兰YABBY家族基因DROOPING LEAF的克隆和表达分析开题报告

1. 研究目的与意义

YABBY家族基因为种子植物所特有，参与胚胎发育、侧生器官分化等生物学过程。本试验以春兰花芽为材料，克隆得到1个YABBY家族基因DL基因DROOPING LEAF，进行了氨基酸序列以及进化树分析，丰富春兰形态建成中花器官发育的调控机制的理论基础知识，为其他同属植物相关研究提供理论依据。

2. 国内外研究现状分析

2000年,Yu等从石斛兰（Dendrobium grexMadame Thong- In）中分离了三个DOMADS基因，DOMADS1、DOMADS2和DOMADS3基因，这三个基因分别属于AGL2、SQUA、OSMADS1亚族，研究表明这三个DOMADS基因在成花时期的茎端分生组织和成熟的花中都表达。DOMADS1在花序分生组织和花原基中表达一致，后来在花器官各组织中集中表达；DOMADS2主要在茎尖分生组织表达，在整个成花转换过程中均有表达，开花后期主要在蕊柱中表达；DOMADS3在成花时期的茎端分生组织中第一轮花原基分化早期表达，之后在茎组织中表达。研究结果表明,DOMADS基因在植物成花转化过程中发挥了重要的作用。

2004年，Montieri等用RACE技术从Orchis italica中分离出OrcLFY基因,之后运用OrcLFY序列对14个兰科植物进行了系统进化分析,表明OrcLFY基因在较低分类阶元中可以作为分子标记来构建系统进化树。

2009年，Hou和Yang从文心兰中克隆到OnFT和OnFTL1基因。OnFT的表达受光周期调节,它在文心兰的腋生芽、叶片和假鳞茎中表达,在花中主要表达在萼片和侧瓣中。相反,OnFTL1基因只在腋生芽和假鳞茎中表达,并且不受光周期影响。将OnFT基因转化到拟南芥,转化植株提早开花并失去无限花序。将OnFTL1转化拟南芥,转化植株延迟开花。

3. 研究的基本内容与计划

研究内容：本试验以春兰花芽为材料，克隆得到1个yabby家族基因dl基因drooping leaf，进行了氨基酸序列以及进化树分析，以期丰富春兰形态建成中花器官发育的调控机制的理论基础知识。

研究计划：（1）2016年12月－2017年2月，总rna的提取以及春兰drooping leaf基因的克隆

（2）2017年3月－2017年4月，drooping leaf基因序列分析

4. 研究创新点

目前国内外对YABBY家族基因的研究较少，本研究首次对春兰YABBY家族DROOPING LEAF基因进行克隆和表达分析研究以期探讨此类基因的作用机理。