1. 研究目的与意义
基于西番莲转录组测序数据,设计和筛选多态性SSR引物,建立和完善西番莲SSR分子标记体系,为进一步研究西番莲种质资源遗传变异模式提供多态性DNA标记。
2. 国内外研究现状分析
国内近几年对西番莲的研究,主要是针对它的栽植技术、加工工艺技术、保鲜技术、组成成分、侵染西番莲的病毒分子的鉴定、西番莲病害的发生与防治以及产业现状等方面。
而从遗传角度研究西番莲的只有3篇文章:发表于2017年的西番莲dna条形码遗传多样性分析,发表于2014年的24份西番莲种质ssr分子标记分析以及更早的2008年的西番莲种质资源遗传多样性研究,其中只有2014年的这篇文章研究方向是西番莲ssr分子标记。
但是其他植物,比如白花草木樨、榧树、厚朴、花椒、野生稻等,都有基于ssr分子分析、标记与开发的文献,可以作为参考。
3. 研究的基本内容与计划
研究内容:1、基于西番莲转录组数据,筛选生物信息预测得到的潜在ssr位点,开发一批多态性较高的ssr引物,以期为西番莲种质鉴定、 亲缘关系分析、 基因的定位及分子标记辅助选择育种提供理论性依据。
①查阅相关文献,了解西番莲的生物学特性和ssr分子标记的基本原理;②基于转录组预测的ssr位点数据,设计合适的ssr引物;③建立优化高效的西番莲ssr反应体系; ④验证引物的有效性,筛选出条带清晰的ssr引物。
2、实验数据采集及处理 ①运用misa软件筛选ssr候选位点;②利用primer 3.0程序批量设计含有ssr位点的引物; ③采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法,优化西番莲ssr反应体系; ④通过初筛、复筛,开发出一批条带清晰的ssr引物。
4. 研究创新点
在通过分子标记对植物的种质资源遗传与分子多态性的研究方面,国内外都取得了较为显著的成就。
但是目前国内研究的植物大多是豇豆、杜鹃、花椒、野生稻等,而对西番莲SSR分子标记分析与开发研究的很少。
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