1. 研究目的与意义
本课题的意义、国内外研究概况、应用前景等(列出主要参考文献)中药指纹图谱分析是针对中医理论建立的一种新的质量控制模式,根据中药方剂不仅多为复方,而且有效成分复杂,非单一活性成分所能表达、非线性特点建立的。
它与当前常规中药质量控制模式的主要区别,在于它强调的是多个成分而非单一的成分,以相对稳定的比例关系及位置顺序相互制约的完整色谱或综合的光谱特征为研究对象,即指纹图谱的整体性特征 [1]。
中药指纹图谱技术包括化学指纹图谱、生物指纹图谱、代谢指纹图谱。
2. 研究内容和预期目标
研究的目标、内容和拟解决的关键问题研究的目标、内容连钱草在我国资源极为丰富,除新疆、甘肃、青海、西藏以外其它各省均有连钱草分布,但不同地区连钱草品质存在差异。
通过建立不同地理种源活血丹uplc指纹图谱,进行相似度分析、聚类分析和主成分分析3种方法对不同产地连钱草的质量进行评价,获得较为全面和有效的连钱草的品质评价结果,对获得疗效显著的连钱草饮片有一定意义。
拟解决的关键问题获得色谱峰峰形、分离度良好,基线平整的最适uplc方法实验条件研究方法、技术路线、实验方案及可行性分析研究方法采用超高效液相色谱法(uplc)对多个产区的连钱草样品建立连钱草药材uplc指纹图谱,进行相似度分析、聚类分析和主成分分析来对不同产地连钱草药材进行质量评价。
3. 研究的方法与步骤
研究方法、技术路线、实验方案及可行性分析研究方法采用超高效液相色谱法(uplc)对多个产区的连钱草样品建立连钱草药材uplc指纹图谱,进行相似度分析、聚类分析和主成分分析来对不同产地连钱草药材进行质量评价。
技术路线实验方案1溶液的制备1.1对照品溶液的制备精密称取各对照品适量,配制成含绿原酸、咖啡酸、迷迭香酸的混合对照品溶液,摇匀,4℃贮藏,备用。
1.2供试品溶液的制备精密称取2.5g连钱草药材粉末,加入50ml70甲醇, 1h回流提取,过0.22μm微孔滤膜,待测;用甲醇稀释对照品溶液,配制成浓度为100μg/l的标准溶液。
4. 参考文献
大多中药材化学成分复杂,指标性成分不明确,具有多重作用机制,对人体的作用也存在个体差异。
连钱草以三萜酸类、黄酮类为主要化学成分,并含有多种挥发油、醇类和甾体类化合物,其化学成分复杂,以其中一种或多种化学成分含量进行质量评价时不全面的,难以建立明确的质量评价标准。
通过超高效液相色谱法(uplc)建立连钱草的指纹图谱,可以快速获得连钱草的药效学物质特征,且具有国际认可的稳定性。
5. 计划与进度安排
研究计划2022.05-2022.07查阅相关文献,整理文献综述,制定实验方案2022.07-2022.09采集不同产地活血丹进行移植栽培2022.09-2022.11修改实验方案并进行预实验2022.11-2022.03获得不同产地连钱草超高效液相色谱指纹图谱2022.03-2022.04学习使用超高效液相色谱仪和色谱分析工作软件2022.04-2022.05实验得到所有图谱进行分析和筛选,处理数据,整理所得结果,完成毕业论文预期进展目前,培养不同产区活血丹植株,保证实验样品存活及样品采集;预计在今年4月份之前完成超高效液相色谱法指纹图谱的测定。
学习使用超高效液相色谱仪并学习使用色谱工作站,为接下来获得UPLC指纹图谱和数据分析做准备;5月份整理所得,完成论文。
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