拟研究的问题
青阳参是萝摩科鹅绒藤属植物, 主要分布于我国的云南、贵州、广西、湖南等地区,是云南的民间药物。其性微温、味甘微苦, 具有补气益肾, 强筋壮骨,活血散癖, 祛痰止咳, 除湿解毒的作用。常用于治疗子宫肌瘤、腰肌劳损和跌打损伤等腰痛、肺结核与子宫内膜结核以及各种癫痫[1] 。青阳参现已被开发为出青阳参片, 其有效成分为青阳参总苷。近年来已有许多学者对青阳参的化学成分, 药理毒理活性、含量测定、生药学研究和繁殖技术等做出了深入探索,但是市场上青阳参种类繁多,至今仍没有一个规范的手段来鉴别其真伪。指纹图谱可以通过化学成分的差异来反映药材的真伪、种属差异、批次差异等,从而达到控制药材质量的目的。本研究的目的在于通过建立青阳参的高效液相指纹图谱来达到控制青阳参质量的目的。
拟采用的主要技术手段
建立指纹图谱是有一定技术要求的,本研究主要通过常规水浴回流提取方法得到供试品;指纹图谱的建立主要依靠高效液相色谱,因为青阳参中的甾体皂苷有紫外吸收,所以用紫外检测器检测信号;借助计算机对图谱进行解析与处理。
高校液相指纹图谱在中药质量控制中的应用
中药指纹图谱技术应用于中药的鉴别及质量控制,已成为现阶段我国中药基础研究的重要领域与热点。目前中药正处于迈向现代化的瓶颈阶段, 中药指纹图谱的出现为解决这个问题提供了现代技术手段, 成为国内外一种发展趋势。首先是FDA允许草药保健品申报资料可以提供色谱指纹图;世界卫生组织( WHO)也规定: 如果草药的活性成份不明, 可以提供指纹图谱以证明产品质量的一致;高效液相色谱法( HPLC)因其同时对中药化学成分具有很好的分离分析能力而在指纹图谱技术中获得了广泛的应用,是目前检测中药指纹图谱的首选方法。
1.中药HPLC指纹图谱定义及其特点
中药HPLC指纹图谱系指中药材或中成药经适当处理后, 采取HPLC分析手段, 得到能够标示该中药材或中成药特性的共有峰的图谱。指纹图谱一般必须反映出该中药不同于其他任何物质;还能反应出采收期和产地不同而造成的差异[2]。指纹图谱分析强调准确的辨认而不是精密的计算,比较图谱强调的是相似,而不是相同。在不可能将中药复杂成分都搞清楚的情况下,指纹图谱的作用是反映复杂成分的中药内在质量的均一性和稳定性。 差异越小说明药材( 或成药) 的稳定性越好。HPLC适用于非挥发性成分,中药中大部分化学成分均可用HPLC法得出良好的指纹图谱。通过HPLC指纹图谱的特征性, 能有效鉴别样品的真伪。郭澄[3]和李春荣[4]等分别采用HPLC指纹图谱对中药蝼蛄品种以及混乱品种间以及对皱瘤海鞘有效部位进行了鉴定。通过HPLC指纹图谱主要特征峰的面积和比例的制定, 能有效控制样品质量, 保证样品质量的相对稳定。李艳荣等[5]同时测定承德产及其他主产区柴胡中柴胡皂苷a和柴胡皂苷d的含量及其HPLC指纹图谱。结果柴胡皂苷a和柴胡皂苷d的线性范围分别为33.2~531mu;g.mL-1(r=0.9999)、31.8~508mu;g.mL-1(r=0.9999);平均回收率分别为98.6%(RSD=0.9%)、98.9%(RSD=1.2%);15批药材的HPLC指纹图谱共确立6个共有峰。结论所用方法准确可靠,重复性好,为更好地控制柴胡的质量提供了科学依据。德国Schwabe药厂生产的银杏叶制剂, 其稳定的HPLC指纹图谱保证了生产工艺的标准化和其产品批间的稳定性[6]。
2.中药HPLC指纹图谱的方法构建
2.1供试品的选择
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