1. 研究目的与意义
重金属是沿食物链进入人体的重要污染物，工业的过度发展和人们对于环保意识的淡薄，使得水体和土壤及农作物成为重金属污染对象。
铅（lead, pb）进入人体后可直接进入脑部，也可积蓄在人体的骨骼、动脉、肝、肾、胰脏中，从而造成神经系统、血液系统、心血管系统和生殖系统等多个器官和组织造成损伤，最终导致认知能力和行为功能改变，具有致突变性和致癌性。
我国居民尿铅正常值上限为 0.08 mg/l，因铅摄入体内后不能被机体降解和排出，因此即使每天摄入很低量的铅，也会在人体内储存积累而导致慢性中毒甚至致癌。
2. 研究内容和预期目标
研究内容：
本研究旨在进一步研究大米硒肽sphs-2、tsemmm和semdpgqq对铅致ht22细胞氧化损伤的保护作用。
拟解决的关键问题：
3. 国内外研究现状
自20世纪70年代初起，硒对动物和人免疫功能影响日趋受到人们的高度重视。科学家对硒的生物学作用研究证明硒能显著地影响免疫系统、增强细胞免疫、体液免疫及非特异性免疫功能。硒对维持动物免疫系统的正常运转必不可少，能够提高机体的免疫地位和抗炎功能。
大米蛋白是一种优质的植物蛋白，经过酶水解后，不仅不会减少蛋白质的营养价值，还能获得比原来蛋白质更多的具有活性多肽和氨基酸。由大米副产物米渣制备获得的生物活性肽具有抗氧化作用、调节免疫力、辅助降低血压和减轻动脉粥样硬化等功能。张等[1]从通过5种不同蛋白酶水解大米蛋白，并分离纯化获得2种高活性抗氧化肽，并用maldi-tof（基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱）鉴定出一级结构，分别959.5da 的phe-arg-asp-glu-his-lys-lys 和1002.5da的lys-his-asp-arg-gly-asp-glu-phe肽片段。多数研究已证明大米活性肽具有免疫活性，现已有多种具有调节免疫作用的功能食品[2]被卫生部批准。chen等[3]通过人体白血病细胞 u937模型的建立，证明从大米中获得的清蛋白具有激活人体抗白血病的免疫应答功能。在大米清蛋白研究中，takahashi等[4]已经分离获得一种大米活性肽，结构为gly-tyr-pro-met-tyr-pro-leu-arg，具有免疫调节活性，在浓度为1μmol/l时，吞噬作用明显，吞噬指数为控制值的1.5倍。
我国有60%以上人口以大米为主食，年消费稻谷近1.8亿吨。因此，大米对于以其为主食的人群来说，是一种很重要的膳食硒来源。通过生物强化的方式生产富硒大米，是改善我国居民膳食硒营养状况的一种有效途径。自上世纪90年代，富硒大米因具有较高的营养保健价值被广泛研究。xu等证明富硒大米的水提物具有较好的抗氧化活性，与硒的含量成剂量-效应关系。动物试验结果表明，富硒大米对环磷酰胺诱导的小鼠骨髓嗜多染红细胞微核形成和由丝裂霉素诱导的小鼠睾丸染色体畸变具有显著的抑制作用，同时，与亚硒酸钠对照组有不同的抑制效果[4]。20世纪80至90年代，研究者们发现不同形态的硒在体内的代谢和生物活性有很大的差异。已有研究利用离子对反相（ip-rp）和强阴离子交换（sax）色谱联用电感耦合等离子体质谱（icp-ms）和电喷雾质谱（nanoesi-ms）进一步明确了富硒大米中的主要形态硒代甲硫氨酸（semet）占 86.7%，以semet形式贮存在蛋白肽链中[5]。
4. 计划与进度安排
细胞培养 →Pb浓度筛选 →硒肽浓度筛选 → 细胞形态观察 →一氧化氮（NO）含量测定 →乳酸脱氢酶（LDH）漏出率测定 →活性氧（ROS）水平检测 →细胞凋亡水平检测细胞总SOD、GSH-Px水平检测 →细胞总SOD、GSH-Px水平检测 →Western Blotting 检测相关蛋白表达
5. 参考文献
参考文献：
[1]zhang j, zhang h, wang l, et al. isolation andidentification of antioxidative peptides from rice endosperm protein enzymatichydrolysate by consecutive chromatography and maldi-tof/tof ms/ms. foodchemistry, 2010, 119(1): 226-234
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