不同壳聚糖固定化木瓜蛋白酶的研究开题报告

1. 研究目的与意义

壳聚糖又称脱乙酰甲壳素，是由自然界广泛存在的几丁质经过脱乙酰作用得到。纯壳聚糖都是一种白色或灰白色半透明的片状或粉状固体，无味、无臭、无毒。它的一个显著特性是吸附能力，可以有选择性的发挥作用，作为酶固定载体有独特的生化性质：无毒性、良好的凝胶特性、独特的生物兼容性、降解产物的无毒性、金属离子螯合性。通过研究不同壳聚糖固定化木瓜蛋白酶酶学特性，得出最适酶活工艺条件，有利于提高酶的利用率，循环利用。酶固定化后一般稳定性增加，易从反应系统中分离，且易于控制，能反复多次使用，便于运输和贮存，有利于自动化生产。

2. 研究内容和预期目标

本实验采用四种不同壳聚糖为载体，采用交联法将木瓜蛋白酶固定化，研究固定化木瓜蛋白酶的固定化工艺。测定游离酶和固定化酶的米氏表观常数，研究固定化酶与底物的亲和力。

关键问题：1、不同分子量和不同脱乙酰度的壳聚糖对固定化木瓜蛋白酶活性的影响； 2、讨论不同固定化条件对固定化酶活力的影响

3. 国内外研究现状

固定化酶是20世纪60年代以来迅速发展起来的一项新技术。我国的固定化酶的研究始于1970，首先是中国科学院微生物所和上海生化所的酶学工作者同时开始的研究。固定化方法可分为吸附法、包埋法、共价键结合法、肽键结合法、交联法。但固定化酶的过程中还存在几个难题:酶的活性中心发生物理化学变化导致酶活力降低；酶和载体结合不牢固，容易脱落，酶活力损失大；固定化颗粒成型困难等。固定化酶在医药、食品、化工、化妆品、水处理、生化和生物医学工程等诸多领域有重要应用。固定化酶是近十余年发展起来的酶应用技术，在工业生产、化学分析和医药等方面有诱人的应用前景。

4. 计划与进度安排

第一部分：不同壳聚糖为载体对固定化木瓜蛋白酶活性的影响；

第二部分：不同固定化方法（球型、块型）对固定化酶活性的影响；

5. 参考文献

[1]夏文水，谭丽，壳聚糖固定化酶研究进展.[j]食品与机械 2007.0623-6

[2]徐莉,候红萍.酶的固定化方法的研究.酿酒科技.2010,1:18-20.

[3]杨勇，李彦锋，易柳香，夏春谷.酶固定化技术用载体材料的研究进展.化学通报.2007.4