Bacillus coagulans木糖异构酶基因的克隆表达开题报告

 2021-08-08 03:11:38

1. 研究目的与意义

木糖异构酶 (xylose isomerase) 可以催化五碳糖d-木糖转化为d-木酮糖,在微生物体内的糖代谢过程中起着重要的作用;在体外亦能催化d-葡萄糖到d-果糖的异构化反应,所以又称为葡萄糖异构酶。

木糖异构酶具有极其重要的工业应用价值,和蛋白酶、淀粉酶等并称为重要的工业用酶,引起研究人员的关注并对其开展了较为广泛的研究。

在基础研究方面,发现该酶的结构非稳定,是研究蛋白质结构与功能关系优良模型之一。

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2. 国内外研究现状分析

见文献综述

3. 研究的基本内容与计划

过 程(1)凝结芽孢杆菌基因组的提取;(2)以已完成全基因组测序的凝结芽孢杆菌的木糖异构酶基因序列为参照设计引物以备扩增目的菌株的木糖异构酶基因;(3)目的菌株的木糖异构酶基因的克隆;(4)将目的基因连接到表达载体后转入大肠杆菌表达宿主对木糖异构酶进行异源表达。

(5)木糖异构酶活力的测定。

测定方法:采用木糖异构酶偶联山梨醇脱氢酶法进行。

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4. 研究创新点

见文献综述

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