酶法提取香菇多糖的研究开题报告

1. 研究目的与意义

香菇多糖（lentinan 简称lnt）是从伞菌科香菇属的天然香菇子实体中提取得到的一种β(1-3）葡聚糖。它是一类具有调节人体生理机能、增强人体免疫力、预防和治疗多种慢性疾病作用的物质，尤其是它具有显著的、独特的抗肿瘤活性，并减轻放疗和化疗的毒副作用，其抗肿瘤的药理作用并非直接杀死致病源，而是通过刺激免疫细胞成熟、分化，增强和改善人体机能平衡，恢复和提高人体细胞对淋巴分子、激素及其它生理活性因子的反应。80年代以来，香菇多糖的研究更为深入，香菇多糖的提取由子实体发展到从深层发酵香菇菌丝体，对香菇多糖的研究大量转向药理和临床实验，结果表明香菇多糖具有广泛的抗肿瘤作用，尤其对慢性粒细胞白血病、胃癌、鼻烟癌、直肠癌和乳腺癌等有抑制作用和防止手术后转移的效果，适用于病后机体康复，是目前已知较强的免疫增强剂。此外，香菇多糖还是治疗各种肝炎，特别是慢性迁移肝炎的良好药物。目前，香菇多糖是市场上常见的医药和保健用品。香菇多糖是一种特殊的生物活性物质，它能增强体液免疫和细胞免疫功能，它的抗病毒作用机制在于其提高感染细胞免疫力，增强细胞膜的稳定性，抑制细胞病变，促进细胞修复等功能。目前市场上已经出现大量的香菇多糖保健食品如香菇多糖胶囊、香菇多糖口服液等。

香菇多糖的提取方法很多，有水溶醇沉法、复合酶解法、超滤法、超声波辅助浸提法、微波辅助浸提法等。传统的热水浸提法虽然是提取多糖的常用方法，操作简单，但时间长、效率低、能耗大；而利用复合酶解法、微波辅助法、超声波辅助法等可以提高提取率、减少能源消耗、缩短提取时间，但对香菇多糖的结构及生物活性是否有破坏，仍有待进一步的探讨。因此，探索更为高效、经济、可靠的提取方法对香菇多糖的研究开发具有现实意义。本论文拟运用单因素试验和正交法对酶法提取香菇多糖的影响因素和水平进行优化，将酶解提取方法与传统提取方法相比，利用红外和紫外吸收光谱分析浸提物，酶法提取率高出传统提取率的6.26，时间上仅用了传统方法的三分之一，其产品在紫外吸收时粗产品杂质含量少，比传统的更接近标准品。测定所得香菇多糖提取物的抗氧化活性。主要测定香菇多糖的dpph自由基清除率、超氧阴离子自由基清除率、羟基自由基清除率等，采用邻苯三酚自氧化法、dpph自由基清除法、超氧阴离子自由基清除法、羟基自由基清除法等。

本文研究拟运用单因素实验和正交实验法对酶法提取香菇多糖的影响因素和水平进行优化，确定最佳的香菇多糖提取条件，并测定所得香菇多糖提取物的抗氧化活性，为其工业化生产和提高利用价值提供基础数据。

2. 研究内容和预期目标

（1）对香菇多糖的提取工艺进行优化。提取方法采用复合酶法，运用单因素实验和正交实验对提取工艺进行优化； （2）对香菇多糖的抗氧化活性进行研究。可测定香菇多糖的DPPH自由基清除率、超氧阴离子自由基清除率、羟基自由基清除率等。

2.研究香菇多糖的抗氧化活性

3. 研究的方法与步骤

香菇干品用打粉机打粉→80目过筛→烘箱烘干备用

单因素实验:分别控制其中三个单因素为定量，另一个单因素为梯度变量进行实验。

控制单因素提取多糖：温度35℃.40℃.45℃.50℃.55℃ 时间1.5h，2h，2.5h，3h，3.5h 料液比1:10，1:20，1:30，1:40，1:50 ph3，4，5，6，7 酶浓度0.00 0.08 0.16 0.24 0.32

4. 参考文献

2．王万能，刘丹，杨颖，等. 香菇多糖抗肿瘤活性的研究进展[j]. 重庆工学院学报（自然科学），2008，22（1）：161-163.

3．杜小燕，侯颖，张晓楠，等. 正交实验法优选香菇多糖的提取工艺及其硫酸醋化研究[j]. 现代生物医学进展，2008，8(12)：2466～2468,2475.

4．邹东恢，梁敏，杨勇，等. 香菇多糖复合酶法提取及其脱色工艺优化[j]. 农业机械学报，2009，40(3)：134～138.

5. 计划与进度安排

1.1-4周：查阅文献，制定实验方案，撰写开题报告，学习软件使用；

2.5-6周：开始实验准备工作，进行预实验，熟悉实验方法；

3.7-10周：使用复合酶法从香菇子实体中提取胞内多糖，利用单因素试验和正交试验确定最佳的提取方法；