人类SVBP蛋白的体外重组构建研究开题报告

1. 研究目的与意义

蛋白质酪氨酸化是蛋白质重要的功能调节之一，在细胞周期调控过程中起着重要的作用。微管蛋白是真核细胞骨架的关键组分，与细胞功能密切相关。微管蛋白的酪氨酸化/去酪氨酸化循环是最早发现的一种可逆的翻译后修饰，但若微管蛋白的酪氨酸化/去酪氨酸化循环的失调则会导致功能的紊乱，与癌症、心肌病、大脑功能障碍等疾病紧密相关。

2. 研究内容和预期目标

本实验主要研究一种小分子血管抑制结合蛋白（SVBP），该蛋白能与血管抑制蛋白（VASH）相结合，这两个蛋白相互作用后具有微管去酪氨酸活性。进而调节微管的组装与去组装。我们主要通过体外构建该蛋白的重组蛋白，进而研究其与其他蛋白的相互作用以及蛋白结构的具体信息，为后续功能性研究或蛋白相互作用研究提供物质基础。

3. 研究的方法与步骤

1.目的基因的确定。需要确定我们的所需要的片段，了解他的基因序列。

2.设计引物，设计合成基因序列

3.通过pcr技术，目标基因的扩增、剪切、细胞转化、细胞培养、转化子的检测以及重组子等

4. 参考文献

1.程诚，郑瑞锋和王彦威；vash vash1 1和 和vash vash2 2表达对食管鳞状细胞癌患者预后的影响 表达对食管鳞状细胞癌患者预后的影响，2019，《癌症进展》，23期

2.葛倩倩，涂敏，高文涛等；核型vash2促进人胚胎组织细胞的增殖研究，《南京医科大学学报》，2015年5月

3.iqbal zafar;tawamie hasan;ba wei et.al;loss of function of svbp leads to autosomal recessive intellectual disability, microcephaly, ataxia, and hypotonia.2019,genetics in medicine : official journal of the american college of medical genetics

5. 计划与进度安排

（1）2022-2022-1学期17-20周~2022-2022-2学期第1周~第2周，查阅资料，目的基因序列的确定，准备开题报告，外文论文翻译；（2）第3周~第6周（2022-3-9~4-3），选择突变位点，设计引物，合成基因序列等初步设计；（3）第7周~第11周（2022-4-6~5-8），目标基因扩增、剪切、细胞转化、细胞培养、转化子的检测以及重组子等（4）第12周~第14周（2022-5-11~5-29），整理、撰写论文，完成；一张基因扩增电泳检测图、一张质粒酶切电泳检测图，一张重组子构建检测图（5）第15周~第16周（2022-6-1~6-10），提交重组子构建的重组细胞、实验报告、英文翻译、图表等，毕业答辩。