染色体重塑在ABERRANT PANICLE ORGANIZATION 2/RFL（APO2）调控水稻穗发育进程中的功能分析开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

水稻是三大粮食作物之一，同时水稻也是我国主要的粮食作物之一。

食用稻米人数约占我国总人口的50%。

水稻穗部性状和水稻最终产量明显相关。

2. 研究的基本内容和问题

研究的目标、内容和拟解决的关键问题研究目标：1、明确APO2参与水稻中染色体重塑机制；2、验证APO2与染色体重塑因子SYD存在直接互作； 研究内容：1、阅读文献，寻找SYD专一性的抗体；2、通过体外、体内互作实验，验证APO2与SYD直接互作；拟解决的关键问题：1、寻找SYD抗体，为免疫共沉淀实验提供实验材料；2、构建APO2、SYD双分子荧光蛋白；

3. 研究的方法与方案

研究方法、技术路线、实验方案及可行性分析研究方法：1、观察syd突变体的表型；2、免疫共沉淀验证酵母双杂筛选的与apo2互作的蛋白；3、bifc验证apo2与syd体内互作；4、拉下实验验证apo2与syd体外互作； 技术路线：1、免疫共沉淀；2、bifc；3、拉下实验； 实验方案：1、在南京农业大学农业部作物生长调控重点开放实验室筛选前期构建的syd突变体，确保无潮霉素抗性。

后期移植到牌楼试验站，t2代观察syd突变体的表型，并与野生型相比较。

2、查阅文献寻找syd抗体进行免疫共沉淀实验；3、bifc进行体内互作实验，若出现荧光信号，则说明apo2与syd在体内存在互作；4、进行pull-down实验，若存在条带，则说明apo2与syd体外直接互作； 可行性分析：1、研究基础扎实，材料与方法齐备指导教师从事了多年幼穗分化方面的研究，具有丰富的分子生物学知识，成功构建了10余中转基因材料。

4. 研究创新点

特色或创新之处（1） 科学问题源自生产实践。

水稻是三大粮食作物之一，也是我国主要的粮食作物之一。

我国约50%的人口以水稻为主食，因此提高水稻产量至关重要。

5. 研究计划与进展

研究计划及预期进展（1）2016年7-8月联系导师，搜集相关资料文献，制定试验计划。

（2）2016年9月-2016年12月查阅文献，设计并构建apo2、syd双分子荧光蛋白载体；尝试注射烟草实验，为体内互作验证打下基础；（3）2016年10月-2017年6月观察syd突变体的表型，统计出叶速率、叶长、叶宽等数据，与野生型相比较。

（4）2017年2月-2017年5月寻找syd专一性抗体进行免疫共沉淀，同时操作bifc和拉下实验。